沒(méi)食子酸，別名3，4，5-三羥基苯甲酸、五倍子酸；棓酸、沒(méi)食子酸（無(wú)水）；在制藥，墨水，染料，食品，輕工和有機(jī)合成等方面有許多用途.沒(méi)食子酸與三價(jià)鐵離子生成藍(lán)黑色沉淀，是藍(lán)黑墨水的原料；工業(yè)上也用于制革；還可做照相顯影劑.沒(méi)食子酸丙酯為抗氧劑，可用于食用油脂以防腐臭變質(zhì).在醫(yī)藥上沒(méi)食子酸是止血收斂劑，也是溫和的局部刺激劑.

目的建立沒(méi)食子中沒(méi)食子酸的含量測(cè)定方法.方法采用液相色譜法測(cè)定沒(méi)食子酸的含量，色譜柱為Waters Symme @Cl8柱(5μm，4.6mm×150mm)；流動(dòng)相為甲醇一0.05％磷酸溶液(5：95)；流速0.8 ml/min ；檢測(cè)波長(zhǎng)273Bill.結(jié)果沒(méi)食子酸進(jìn)樣量在0.0506～0.4060μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，平均加樣回收率為98.99％，RSD：1.5％.結(jié)論所用方法簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確.

采用HPLC測(cè)定沒(méi)食子中沒(méi)食子酸的含量.

1、實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器與試藥：高效液相色譜儀包括Waters Delta 6OO泵，waters 2996PDA檢測(cè)器(美國(guó)Waters公司).沒(méi)食子藥材(新疆維吾爾自治區(qū)藥品檢驗(yàn)所鑒定)；沒(méi)食子酸對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)：0831—9501)；甲醇(色譜純)；磷酸(分析純)；水為重蒸水.

1.2 色譜條件

色譜柱為Waters SymmetryCl8(5μm，4.6mm×150mm)；流動(dòng)相為甲醇一0.05％磷酸溶液(5：95)；檢測(cè)波長(zhǎng)273nm；流速0.8 ml/min ；柱溫25℃.

1.3 方法與結(jié)果

1.3.1 溶液的制備：精密稱(chēng)取沒(méi)食子粗粉1 g，置50 m1量瓶中，加甲醇30 m1，超聲提取1 h，加甲醇至刻度，搖勻，濾過(guò)，精密吸取續(xù)濾液lm1，甲醇定容至l0 m1量瓶中，搖勻，作為供試品溶液.精密稱(chēng)取干燥至恒重的沒(méi)食子酸對(duì)照品2.55mg，置50m1量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，得對(duì)照品溶液.

1.3.2 線性范圍的考察：精密吸取沒(méi)食子酸對(duì)照品溶液1.0、2.0、4.0、6.0、8.0 ml于5個(gè)l0m1量瓶中，分別加甲醇至刻度，搖勻，各吸取l0 l注入高效液相色譜儀，以進(jìn)樣量(g)為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，回歸，得線性方程為：A=1.468×lO6C-1.739×lO4(r=0.9997).結(jié)果表明，沒(méi)食子酸在0.0506 0.4O60／_tg范圍內(nèi)，具有良好的線性關(guān)系.

1.3.3 精密度試驗(yàn)：在“1.2.1”項(xiàng)條件下，精密吸取沒(méi)食子酸對(duì)照品溶液10μl，連續(xù)進(jìn)樣6次，峰面積的RSD=1.3％，表明儀器精密度良好.

1.3.4 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)：取室溫下放置的樣品溶液，在20 h內(nèi)進(jìn)樣6次，其峰面積的RSD=2.4％，表明樣品溶液在室溫下20 h穩(wěn)定.

1.3.5方法精密度(重復(fù)性)試驗(yàn)：精密稱(chēng)取沒(méi)食子藥材1g，按“1.3.1”項(xiàng)下方法制備6份供試品溶液，分別測(cè)定沒(méi)食子酸的含量，RSD=3.8％，證明此方法精密度良好.

1.3.6 加樣回收率試驗(yàn)：精密稱(chēng)取已知含量的沒(méi)食子樣品細(xì)粉，分別加入沒(méi)食子酸對(duì)照品。

1.3.7 樣品的測(cè)定：精密稱(chēng)取沒(méi)食子藥材1g，按“1.3.1”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，經(jīng)微孔濾膜(0.45μm)過(guò)濾，取續(xù)濾液l0l進(jìn)樣，同時(shí)進(jìn)l0μl對(duì)照品溶液，進(jìn)樣5次，用峰面積按外標(biāo)法計(jì)算，得沒(méi)食子酸的平均含量31.65 mg/g，RSD=0.98％(n=5).

2、討論

沒(méi)食子中主要含有可水解的鞣質(zhì)，加熱提取會(huì)水解成沒(méi)食子酸，因此，樣品選用超聲提取的方法.曾分別超聲0.5、1.0、1.5、2.0 h，結(jié)果顯示，1.0h已經(jīng)提取完全.文中方法用于沒(méi)食子中沒(méi)食子酸的含量測(cè)定，操作簡(jiǎn)便，結(jié)果準(zhǔn)確.

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