本檢測(cè)方法源自關(guān)于印發(fā)全國(guó)打擊違法添加非食用物質(zhì)和濫用食品添加劑專(zhuān)項(xiàng)整治抽檢工作指導(dǎo)原則和方案的通知 食品整治辦[2009]29號(hào)
1 原理
液態(tài)奶樣品沉淀蛋白、去除脂肪后，用離子色譜分析，電導(dǎo)檢測(cè)器檢測(cè)，外標(biāo)法定量。
2 實(shí)驗(yàn)部分
2.1 試劑與材料
2.1.1 試驗(yàn)用水均為超純水
2.1.2 乙腈（色譜純）
2.1.3 固相萃取小柱：onGuard RP柱（2.5cc），或相當(dāng)者（如C18），使用前依次用5 ml甲醇和10 ml水活化。
2.1.4 硫氰酸標(biāo)準(zhǔn)品：北京化工廠
2.1.5 硫氰酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液
將硫氰酸標(biāo)準(zhǔn)品于80度烘箱內(nèi)烘干2小時(shí)。準(zhǔn)確稱(chēng)取干燥后的硫氰化鉀1.6732g于1000ml容量瓶中，定容，混勻。即得1000ppm硫氰根標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。
2.1.6 硫氰酸標(biāo)準(zhǔn)中間液
取硫氰酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液 1 mL，置于100 mL容量瓶中，加水至刻度。此溶液含硫氰酸10 mg/L。
2.1.7 硫氰酸標(biāo)準(zhǔn)使用液
移取0.1、0.2、0.5、1.0、2.0 mL硫氰酸標(biāo)準(zhǔn)中間液，用水定容于10 mL容量瓶中，濃度分別為0.1、0.2、0.5、1.0、2.0 mg/L。
2.2 儀器
2.2.1 離子色譜儀：配備淋洗液發(fā)生器和電導(dǎo)檢測(cè)器；
2.2.2 離心機(jī)：冷凍離心機(jī)。
2.3 樣品處理
取4mL液體奶樣品，加入5mL乙腈沉淀蛋白，取上清液稀釋10倍，過(guò)RP柱（或經(jīng)冷凍離心機(jī)）去除脂肪后上機(jī)。
2.4 離子色譜參考條件
色譜柱：強(qiáng)親水性陰離子交換柱。IonPac AS16，4.0×250mm分析柱；IonPac AG16，4.0×50mm保護(hù)柱；或其他相當(dāng)者。
流動(dòng)相：KOH溶液，梯度淋洗。淋洗液由淋洗液在線發(fā)生器在線產(chǎn)生。
KOH梯度程序如下：
時(shí)間（min） KOH濃度（mmol）
0 45
13 45
13.1 70
18 70
18.1 45
2345
流速：1.0 mL/min；
抑制器：ASRS-300型抑制器，4mm；
抑制器抑制模式：外接水模式，抑制電流175mA；
柱溫：30℃；
進(jìn)樣體積：100 μL。
3 結(jié)果計(jì)算
X= c*9*10/4 …………………………（1）
式中：
X——液態(tài)奶中硫氰酸的含量，單位為微克每毫升（μg/mL）；
c——由標(biāo)準(zhǔn)曲線得到試樣溶液中硫氰酸的濃度，單位為微克每毫升（μg/mL）；
9——液態(tài)奶的體積與乙腈體積之和，單位為毫升（mL）；
4——液態(tài)奶的體積，單位為毫升（mL）；
10——稀釋倍數(shù)；
計(jì)算結(jié)果保留兩位有效數(shù)字。
4 精密度
在重復(fù)性條件下，獲得的硫氰酸的兩次獨(dú)立測(cè)試結(jié)果的絕對(duì)差值不大于其算術(shù)平均值的5%。
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