一、紫外可見分光光度計(jì)的誕生
世界首臺(tái)紫外可見分光光度計(jì)誕生于1918年的美國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)局。后來紫外可見分光光度計(jì)經(jīng)不斷改進(jìn)，又出現(xiàn)自動(dòng)記錄、自動(dòng)打印、數(shù)字顯示、微機(jī)控制等各種類型的儀器，使光度法的靈敏度和準(zhǔn)確度也不斷提高，其應(yīng)用范圍也在不斷擴(kuò)大。紫外可見分光光度法從問世以來，在應(yīng)用方面有了很大的發(fā)展，尤其是在相關(guān)學(xué)科發(fā)展的基礎(chǔ)上，促使分光光度計(jì)儀器的不斷創(chuàng)新，功能更加齊全，使得光度法的應(yīng)用更拓寬了范圍。
二、紫外可見分光光度計(jì)的工作原理
1、紫外可見分光光度計(jì)基本工作原理和紅外光譜儀相似，利用一定頻率的紫外可見光照射被分析的有機(jī)物質(zhì)，引起分子中價(jià)電子的躍遷，它將有選擇地被吸收。一組吸收隨波長(zhǎng)而變化的光譜，反映了試樣的特征。
2、紫外可見光的范圍內(nèi)，對(duì)于一個(gè)特定的波長(zhǎng)，吸收的程度正比于試樣中該成分的濃度，因此測(cè)量光譜可以進(jìn)行定性分析，而且根據(jù)吸收與已知濃度的標(biāo)樣的比較，還能進(jìn)行定量分析。
三、首次使用紫外可見分光光度計(jì)人員須知
1、首次使用紫外可見分光光度計(jì)的人員，一般來說，一定要詳細(xì)閱讀儀器安全操作手冊(cè)，否則嚴(yán)禁操作儀器。準(zhǔn)備操作儀器前，需要先查看一下指針儀器在斷電的情況下，表面指針是否指向零刻度。如若不是，理應(yīng)先調(diào)零然后才能連接電源。在使用的過程中，操作員應(yīng)該盡量避免對(duì)鏡燈的觸碰，放大器使用過后，一定需要把檔位歸置到零。
2、除此之外，在操作紫外可見分光光度計(jì)時(shí)，操作人員需要留意一下機(jī)器的干燥劑，因?yàn)檫@是非常重要的。通常情況下，干燥劑有效時(shí)，儀器的工作是不會(huì)出現(xiàn)任何問題的?？墒钱?dāng)干燥劑失效之后，所出現(xiàn)的問題是非常嚴(yán)重的。除了儀器上面顯數(shù)不準(zhǔn)之外，很容易使反射鏡變得污穢，從而使得光線率不準(zhǔn)確。因此，日常使用儀器時(shí)，一定要注意干燥是否有效。當(dāng)發(fā)現(xiàn)失效后，要及時(shí)進(jìn)行更換。
四、分光光度計(jì)使用注意事項(xiàng)
1、紫外可見分光光度計(jì)在開機(jī)前將樣品室內(nèi)的干燥劑取出，儀器自檢過程中禁止打開樣品室蓋。
2、筆式PH計(jì)測(cè)定時(shí)，禁止將試劑或液體物質(zhì)放在儀器的表面上，如有溶液溢出或其它原因?qū)悠凡叟K，要盡可能及時(shí)清理干凈。
3、比色皿內(nèi)溶液以皿高的2/3～4/5為宜，不可過滿以防液體溢出腐蝕儀器。測(cè)定時(shí)應(yīng)保持比色皿清潔，池壁上液滴應(yīng)用擦鏡紙擦干，切勿用手捏透光面。測(cè)定紫外波長(zhǎng)時(shí)，需選用石英比色皿。
4、實(shí)驗(yàn)結(jié)束后將比色皿中的溶液倒盡，然后用蒸餾水或有機(jī)溶劑沖洗比色皿至干凈，倒立晾干。關(guān)電源將干燥劑放入樣品室內(nèi)，蓋上防塵罩，做好使用登記，得到管理老師認(rèn)可方可離開。
五、紫外可見分光光度計(jì)出現(xiàn)問題處理方法
1、儀器電源接通后，光源不亮。
原因：
①光源燈泡已損壞。
②保險(xiǎn)管燒壞。
處理方法：
①更換氘燈或鎢燈。
②更換保險(xiǎn)管。
2、紫外可見分光光度計(jì)噪音較大。
原因：光源燈泡使用時(shí)間超過壽命期。
處理方法：更換光源燈泡。
3、自檢時(shí)提示波長(zhǎng)自檢出錯(cuò)。
原因：自檢過程中可能打開過儀器樣品室的蓋子。
處理方法：關(guān)上儀器樣品室蓋子，重新自檢。
4、儀器自檢時(shí)提示通訊錯(cuò)誤。
原因：儀器與電腦之間的數(shù)據(jù)線沒有連接好。
處理方法：連接好數(shù)據(jù)線，重新打開儀器和軟件，重新自檢。
5、儀器零點(diǎn)飄忽不定，主要反映在簡(jiǎn)易儀器上。
原因：在簡(jiǎn)易儀器中，零點(diǎn)往往是通過電位器來調(diào)整，這種電位器一般是炭膜電阻制作的，使用久了往往造成接觸不良。
處理方法：更換電位器。
6、在使用過程中，出現(xiàn)數(shù)字顯示不能歸零，同時(shí)伴有圖線記錄基線位置偏高。
原因：
①光電倍增等老化，性能降低。
②信號(hào)處理板可能發(fā)生故障。
③前置放大版出現(xiàn)故障，引起反饋量增大。
處理方法：
①開機(jī)通電，先做記錄故障曲線，再與原始記錄的標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)照，找出異同點(diǎn)，并作一下定性定能分析。然后用一只同型號(hào)規(guī)格的新光電倍增管替換機(jī)上的光電管，再開機(jī)實(shí)驗(yàn)，結(jié)果記錄出來的圖線并沒有什么變化，由此證明光電倍增管沒有老化變質(zhì)。
②進(jìn)一步檢查信號(hào)處理板，未發(fā)現(xiàn)信號(hào)處理板各元器件損壞，對(duì)影響靈敏度有關(guān)的電位器檢測(cè)，結(jié)果測(cè)得數(shù)據(jù)正常，這說明信號(hào)處理板沒有故障。
7、測(cè)試過程中提示能量太低。
原因：
①光源燈泡使用時(shí)間超過壽命期。
②樣池中有不透光的東西擋住了光。
處理方法：
①更換光源燈。
②拿走擋光的物品。
8、吸光值結(jié)果出現(xiàn)負(fù)值（最常見）。
原因：沒做空白記憶、樣品的吸光值小于空白參比液。
處理方法：做空白記憶、調(diào)換參比液或用參比液配置樣品溶液。
9、當(dāng)儀器波長(zhǎng)固定在某個(gè)波長(zhǎng)下時(shí)，吸光值信號(hào)上下擺動(dòng)，特別是測(cè)量模式轉(zhuǎn)換為按鍵開關(guān)式的簡(jiǎn)易儀器。
原因：開關(guān)觸點(diǎn)因長(zhǎng)期氧化所致造成接觸不良。
處理方法：用金屬活化劑清洗按鍵觸點(diǎn)即可。
10、樣品信號(hào)重現(xiàn)性不良
原因：排除儀器本身的原因外，最大的可能是樣品溶液不均勻所致，在簡(jiǎn)易的單光束儀器中，樣品池架一般為推拉式的，有時(shí)重復(fù)推拉不在同一個(gè)位置上。
處理方法：
①采取正確的試樣配置手段。
②修理推拉式樣品架的定位碰珠。
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